Hémocultures

Tout patient hospitalisé qui présente de la fièvre ou des signes de septicémie doit faire l'objet d'hémocultures. La septicémie étant l'une des principales causes de décès, l'identification rapide d'une infection sanguine est indispensable pour mettre en œuvre une antibiothérapie adéquate. Plusieurs séries d'hémocultures peuvent être nécessaires et des cultures d'autres sites doivent également être envisagées (urine, peau et gorge, par exemple).

Comment prélever des hémocultures ?

Précautions

• Des techniques aseptiques doivent être utilisées afin que les bactéries de la peau ne contaminent pas les flacons de culture.

• Idéalement, la peau doit être lavée au savon et rincée à l'eau stérile. Il faut ensuite appliquer une solution à base d'iode, puis la laver après 30 secondes de séchage avec une solution d'alcool à 70 %. En pratique, cela se produit rarement ; cependant, il faut s'efforcer d'utiliser une technique aseptique - par exemple, Betadine® et/ou un spray d'alcool et des gants.

• Il a été démontré que les solutions alcooliques de chlorhexidine réduisent les faux positifs des hémocultures par rapport à la povidone iodée aqueuse.¹

• Les contaminants les plus courants sont Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium spp, Propionibacterium spp et Bacillus spp (mais pas Bacillus anthracis).

Procédure

• Les flacons d'hémoculture standard se composent de deux flacons, l'un contenant les milieux de culture aérobies et l'autre les milieux de culture anaérobies.

• En général, il faut injecter au moins 10 à 15 ml dans les flacons d'hémoculture (cela dépend des types de flacons utilisés).

• De plus petits volumes sont souvent prélevés sur les bébés et les enfants. Il a été démontré que le fait de répartir 1 ml de sang d'un nouveau-né dans deux flacons, aérobie et anaérobie, améliore le rendement de la culture par rapport à 1 ml dans un seul flacon aérobie.²

• Les nouveaux dispositifs d'aspiration permettent la ponction directe de la veine avec transfert du sang dans les hémocultures.

• Dans certains hôpitaux, les phlébotomistes réalisent souvent des hémocultures.

• Les résultats de la contamination peuvent être inférieurs s'ils sont pris par des cliniciens plus expérimentés que par du personnel débutant.

• Des cultures multiples provenant de plusieurs sites augmentent le rendement :
  

  • C'est particulièrement le cas dans l'endocardite infectieuse.

  • Un exemple consiste à prélever du sang dans une fosse antécubitale, 30 minutes plus tard dans la fosse antécubitale opposée et le dernier prélèvement dans un troisième site 30 minutes plus tard.

• Les hémocultures peuvent également être prélevées sur des lignes - par exemple, des lignes de pression veineuse centrale, des lignes artérielles.

• Des études ont montré que les éléments suivants peuvent réduire les taux de contamination :³

  • Respect d'un protocole.

  • Prélèvement par ponction veineuse périphérique plutôt que par l'intermédiaire d'un cathéter intravasculaire.

  • Utilisation de gants stériles.

  • Nettoyage des couvercles des flacons d'hémoculture à l'aide d'antiseptiques.

  • Inoculer les flacons d'hémoculture avant les autres tubes de sang.

  • Prélèvement d'échantillons par une équipe de phlébotomistes.

  • Contrôle des taux de contamination.

  • Fournir un retour d'information individuel et une nouvelle formation pour les personnes contaminées.

• Une étude a montré que l'élaboration d'un nouveau processus de prélèvement d'hémocultures mettant l'accent sur une attention stricte à la technique stérile, avec l'utilisation standardisée d'une antisepsie cutanée à la chlorhexidine, d'aiguilles stériles, de gants stériles, de champs stériles et d'une liste de contrôle des procédures, a permis de réduire la contamination des hémocultures en deçà de 3 %.⁴

• Il a été démontré que la décolonisation universelle par bain de chlorhexidine entraîne une réduction significative de la contamination des hémocultures.⁵

• Une étude a montré que l'utilisation d'un nouveau test PCR automatisé pour la détection de Streptococcus pneumoniae, le GenomEra™ S. pneumoniae, permet d'obtenir des résultats en 55 minutes, ce qui est évidemment beaucoup plus rapide que les méthodes d'identification couramment utilisées.⁶

Problèmes liés aux hémocultures

• La contamination des hémocultures est un problème courant et évitable, en particulier dans les services d'urgence.⁷

• Les hémocultures faussement positives dues à la contamination de l'échantillon par des bactéries cutanées sont un problème courant qui peut entraîner l'utilisation inutile d'antibiotiques, des tests de laboratoire supplémentaires et une durée d'hospitalisation plus longue, ce qui se traduit par des coûts hospitaliers supplémentaires importants.⁸

• Les taux de vrais et de faux positifs pour les hémocultures varient, mais se situent généralement entre 5 et 10 %.

• L'utilisation d'équipes de phlébotomistes s'est avérée efficace pour réduire les taux de contamination par hémoculture.⁹

• Il a été démontré que le fait de changer la méthode de prélèvement des hémocultures pour un processus plus stérile entraîne une réduction significative de la contamination des hémocultures.⁷

Types de flacons de culture

• Il existe différents types de systèmes d'hémoculture, manuels ou automatisés.

• D'autres flacons de culture sont disponibles et leur utilisation dépend du scénario clinique - par exemple, des flacons de culture pour la tuberculose ou les champignons.

• De nouvelles technologies sont introduites pour permettre l'identification rapide des agents pathogènes dans les hémocultures positives.¹⁰¹¹

• Plusieurs plates-formes moléculaires permettent d'identifier les bactéries associées aux infections sanguines beaucoup plus rapidement que les méthodes standard.¹²

Traitement des hémocultures

• Une fois les hémocultures prélevées, elles doivent être étiquetées et envoyées au laboratoire sans délai.

• En laboratoire, les flacons sont agités et incubés à la température du corps. S'il n'y a pas d'heures de travail, les cultures sont généralement incubées pendant la nuit.

• Les séries de cultures de base sont incubées pendant 14 jours et des cultures en aveugle sont effectuées après 3, 7 et 14 jours ou dès qu'il y a des signes de croissance (par exemple, turbidité, hémolyse, colonies sur la pente de la gélose dans les flacons de Castaneda).

• D'autres flacons peuvent être incubés pendant 7 jours ou jusqu'à 3 semaines si l'on soupçonne une endocardite bactérienne subaiguë (EBS) ou la présence d'organismes fastidieux.

• L'observation des bouteilles, à la recherche d'un résultat positif, est effectuée au moins deux fois par jour lors de l'utilisation de systèmes manuels.

• Des systèmes automatiques existent et sont de plus en plus utilisés. Un exemple est le système d'hémoculture BacT/ALERT® où une croissance positive libère du_CO2 qui est détecté par un capteur qui alerte le personnel du laboratoire (les bouteilles sont placées dans une armoire spéciale et reliées au patient par un code-barres).

• Il a été démontré que les nouveaux flacons BacT/ALERT® FAPlus et FNPlus BC contenant des billes polymériques fixant les antibiotiques améliorent le diagnostic des bactériémies.¹³

• Si une croissance est détectée, les flacons sont repiqués et une coloration de Gram est effectuée. Sur la base de cette coloration, les sensibilités pertinentes sont déterminées. Dans certains cas, l'organisme peut être identifié dans les heures qui suivent la détection d'un résultat positif, à l'aide d'une coloration de Gram et d'autres tests.

• D'autres tests peuvent être effectués directement sur l'hémoculture pour accélérer l'identification : groupage streptococcique, test de la coagulase, tests antigéniques pour le pneumocoque et le méningocoque, etc.

• Le microbiologiste examinera alors les résultats et informera le personnel impliqué dans les soins du patient. Ainsi, les patients commenceront un traitement provisoire qui sera confirmé lorsque les sensibilités seront connues.

• En général, s'il y a croissance, il n'y a qu'un seul organisme ; cependant, dans de très rares cas, il peut y avoir plusieurs organismes et le laboratoire effectuera des sensibilités et des tests supplémentaires sur tous les organismes.